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阴道分泌物PIP活性检测快速诊断细菌性阴道病及治疗效果观察           ★★★ 【字体：小 大】
阴道分泌物PIP活性检测快速诊断细菌性阴道病及治疗效果观察
作者：佚名    论文来源：本站原创    点击数：    更新时间：2008-10-3    
作者：于庆珍，杨文东，郭连俊
【摘要】  目的：探讨阴道分泌物脯氨酸氨基肽酶(PIP)活性检测在细菌性阴道病(BV)诊断中的价值，观察BV患者应用替硝唑的临床疗效。方法：选取疑为BV患者510例,每位患者均一次性留取2份阴道分泌物标本,分别作PIP和传统的Amsel临床诊断标准的判断，然后对检测结果与Amsel结果进行对比分析。对确诊的BV患者采用替硝唑治疗。结果：PIP Test Card与Amsel诊断法确诊结果比较，符合率98.4%（502/510），PIP Test Card测定无1例假阳性；PIP Test Card与Amsel方法相比，敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为：97.37%（297/305）、100%（205/205）、100%（297/297）和96.24%（205/213）；确诊的305例BV患者经替硝唑治疗后，治愈率达到91.2%（278/305），其中247例（81.0%）用药1个疗程，31例（10.2%）用药2个疗程。结论：阴道分泌物PIP活性检测是诊断BV较为可靠的方法,与传统方法相比具有快速、简便,特异性、敏感性均符合临床要求，尤其适用于床边检测。替硝唑是治疗BV相当理想的药物。　
【关键词】  脯氨酸氨基肽酶；细菌性阴道病；替硝唑；诊断；治疗
　　细菌性阴道病（Bacterial Vaginosis，BV）是由于阴道微生态环境菌群与分泌物生化性质变化所引起的一种阴道炎症，是育龄期妇女常见的疾病之一，感染率为15%～50%［1］，有近半数患者可无症状且治疗后易于复发。在妇科BV会引起宫颈炎、慢性盆腔炎、双侧输卵管阻塞而致不孕等；在产科BV可导致胎膜早破、羊膜腔感染、绒毛膜羊膜炎、产后子宫内膜炎、新生儿感染等,故对细菌性阴道病及早作出诊断和进行治疗非常重要。BV诊断的金标准是Amsel临床诊断标准（简称Amsel）［2］。但在临床实践中操作较为烦琐，影响因素较多，且阳性标准难以统一［3］。为此，我们采用美国PIP Test Card技术检测阴道分泌物中的脯氨酸氨基肽酶(PIP)的活性，与Amsel结果进行对比分析，探讨其在BV诊断中的应用价值。并对确诊后的BV患者应用替硝唑进行治疗，以观察其临床疗效。www.lunwenwang.com 论文网在线
　　1  材料与方法
　　1.1  一般资料  2004年11月至2006年10月，就诊于我站、利津县第二人民医院及河口区人民医院妇科门诊疑为BV患者510例，年龄24岁～52岁，平均年龄33.7岁。大部分患者有白带增多、恶臭味症状，以月经干净后或性交后加重，外阴瘙痒、下腹不适或疼痛、月经不调、不孕而就诊。所有患者经询问病史后给予妇科检查，阴窥器扩张阴道后用无菌女性棉拭子尽可能多的收集患者阴道壁下1/3处分泌物，即送检验室检查以确诊BV。所有患者已婚无孕妇，治疗期间不是月经期。要求所有对象就诊前24 h内无性生活，均未采取灌注疗法及使用阴道乳剂。
　　1.2  PIP Test Card检测PIP活性原理  原理是BV相关病原体所分泌的PIP在室温条件下分解底物（L-Prolyl-βnaphthylamide）并显示颜色变化。美国Quidel公司产品，由上海领检科技有限公司提供。
　　1.3  实验室诊断  用无菌女性棉拭子尽可能多的收集患者阴道壁下1/3处分泌物，避免在宫颈口处采集（pH值较阴道内高），每位患者同时采取2份标本，立即送检。第1根棉拭子作Amsel分析，诊断标准：阴道pH值＞4.5；阴道分泌物增多，呈均质灰色乳状；胺实验阳性；阴道液悬滴片上找到线索细胞。若前3项中具备2项且线索细胞占20%以上即为BV阳性。第2根棉拭子作PIP活性检测，按照要求将样品棉拭子在包被有PIP底物和色原（fast rad）的薄膜卡片上测试区内接触并旋转数周，若5 min内在棉拭子头上呈现红色或黄色为BV阳性，无色则阴性。
　　1.4  治疗药物与方法  应用广州侨光制药厂生产的替硝唑片进行治疗，每人每天口服片剂2片（为1.0 g）顿服，首剂加倍，6 d为1个疗程。用药期间禁用其他抗生素，禁性生活和阴道冲洗。疗程结束后1 d～3 d复查，未治愈者接受下1个疗程治疗，治愈者在停药3周后复查。
　　1.5  疗效评定标准  痊愈：自觉症状与体征完全消失，阴道洁净度Ⅰ度；显效：自觉症状与体征明显减轻，阴道洁净度Ⅱ度；有效：自觉症状与体征减轻，阴道洁净度Ⅲ度；无效：自觉症状与体征无变化。
　　2  结果
　　2.1  实验室诊断结果
　　2.1.1  阴道分泌物BV检出情况  在510例疑为BV患者中，Amsel诊断法确诊305例BV阳性，205例BV阴性；PIP Test Card显示297例BV阳性，213例BV阴性，502例与Amsel诊断法符合。与Amsel诊断法确诊结果比较，符合率达98.4%（502/510），PIP Test Card测定无一例假阳性。
　　2.1.2  PIP Test Card与Amsel方法比较  PIP Test Card与Amsel方法相比，敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为：97.37%（297/305）、100%（205/205）、100%（297/297）和96.24%（205/213）。
2.2  治疗结果  确诊的305例BV患者经替硝唑片治疗后，278例痊愈，治愈率91.2%（278/305），其中247例（81.0%）用药1个疗程，31例（10.2%）用药2个疗程。278例痊愈者3周后来复查者205例，复查率73.7%，阴道分泌物检查全部阴性，症状消失。
　　3  讨论
　　3.1  BV的诊断  BV的特征是阴道生态环境的改变，阴道菌群紊乱，由大量致病性厌氧菌取代了正常乳酸杆菌，以加德纳菌形态菌和（或）类杆菌形态细菌为主，其次是弯曲弧菌形态细菌、革兰阳性球菌，这几种细菌可单独感染引起BV，也可混合感染引起BV［4］。以上一种或几种大量增多，粘附在上皮细胞表面，使细胞溶解，边缘呈锯齿状模糊不清，形成BV所特有的线索细胞。线索细胞是细菌性阴道病菌群变化后的必然产物，可作为诊断BV的主要指标［5］。BV患者阴道生态系统紊乱，造成厌氧菌大量繁殖，将产生丁二胺、三甲胺等氨类物质，使pH值升高，碱化阴道，并进一步促进厌氧菌生长，加重BV的临床症状，引起上皮细胞脱落，分泌物增加并产生特殊气味。因此，临床上采用传统的Amsel诊断方法，即阴道分泌物呈均质状均匀覆盖在阴道壁上形成薄薄一层；pH值升高>4.5；胺试验阳性，即将阴道分泌物与盐水混合后滴加1滴～2滴10% KOH，因产胺而释放出鱼腥样臭味；线索细胞阳性，将阴道分泌物与盐水混合后镜检，可见阴道上皮细胞表面附有大量阴道细菌（主要为加德纳菌），使阴道上皮细胞呈颗粒状外观，细胞边界模糊不清。由于BV是阴道中乳酸杆菌与其他多种菌群间的平衡失调所致，BV发病是混合感染。鉴于BV对妇女及其妊娠的危害性，在妇科、产科以及施行外科流产术前进行BV实验室检查具有十分重要的意义。同时在临床上对BV也有了更为严格的定义，即符合Amsel诊断方法4项指标中的3项可诊断为BV，传统的Amsel诊断方法，称为“金标准”。然而要在实际中准确实施并非易事。首先，一些与感染无关的因素如近期性交、阴道灌洗、行经或是存在大量子宫颈黏液等同样可以导致阴道pH值升高，或使分泌物产生异味；而对于作BV诊断最佳标志的线索细胞的识别则受到显微设备的质量、样本的采集以及操作者的经验等诸多因素的共同影响，主观性强，因而很难对判定结果进行统计和比较。随着对BV发病机制的不断深入了解，产生了以检测BV患者阴道分泌物中所特有的微生物的代谢产物为基础的诊断方法，如脯氨酸氨肽酶法及唾液酸酶法。PIP是由阴道加德纳菌和动弯杆菌产生，是BV相关病原体所分泌的特异性标志物。故阴道分泌物存在PIP活性即可诊断BV［6］。本研究PIP Test Card与Amsel方法的符合率为98.4%，具有较高的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值。PIP Test Card测定无一例假阳性，避免了假阳性结果导致患者接受抗厌氧菌治疗，杀灭阴道正常菌群，造成阴道生态环境的失调。采用PIP Test Card诊断BV时应注意，应于阴道下1/3处采集标本，采集前24 h内无性生活、未采取灌注疗法及使用阴道乳剂。与传统方法相比具有更快速、简便,假阳性率低，特异性、敏感性均符合临床要求，尤其适用于床边检测。
　　3.2  BV的治疗  替硝唑为新一代硝基咪唑类抗厌氧菌药，具有临床疗效高、疗程短、副作用小的特点。替硝唑现已广泛应用于临床，本研究采用替硝唑治疗细菌性阴道炎，结果显示治愈率可达91.2%，3周后复查未见复发。替硝唑口服用药后吸收迅速、完全，半衰期长，每天服用一次，方便患者，副反应略轻于甲硝唑。因此替硝唑有较好的安全性，有可观的临床治疗价值，所以替硝唑是治疗BV相当理想的药物。
【参考文献】www.lunwenwang.com 论文网在线
［1］ 马玉楠.细菌性阴道病及其诊断［J］.中华医学检验杂志，2000，23（5）：303304.
［2］ Amsel R,Totten PA,Spiegel CA,et al.Nonspecific vaginitis,diagnostic criteria and microbial and epidemilogic associations［J］.Am J Med Patri,1983,74:1422.
［3］ 李树仁,朱青,李开伦,等.检查线索细胞对细菌性阴道病的诊断价值［J］.中华妇产科杂志,1997,32（6）:371372.
［4］ Mcgregor JA.Bacterial vaginosis is associated with prematurity andvaginal fluid mucinase and sialidase:results of a controlled trial of topi-calclindamycin cream［J］.Am J Obstet Gynecol，1994，170:10481060.
［5］ 张月秋，王扬.细菌性阴道病的实验室诊断200例分析［J］.黑龙江医药科学，2000，23（1）:66.
［6］ Howe L，Wiggins R，Sootholl PW，et al.Mucinase and sialidase activity of the vaginal microflora:Implications for the pathogtnsis of preterm labour［J］.Int J Std Aids，1999，10（7）:442447.
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