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国产CO2试剂在ALCYON生化分析仪上的应用           ★★★ 【字体：小 大】
国产CO2试剂在ALCYON生化分析仪上的应用
作者：佚名    论文来源：本站原创    点击数：    更新时间：2008-10-1    
【关键词】  血气分析
　　【摘要】  目的  为降低成本，探讨能否用国产CO2试剂（CO2L）代替进口CO2试剂（CO2）在ALCYON-300生化分析仪上使用。方法  北京中生CO2试剂使用要求试剂与样品比例为200∶1,而ALCYON生化分析仪对试剂与样品的加量要求特殊，其比例为190∶1，按ALCYON生化分析仪所要求的比例将北京中生CO2试剂应用在ALCYON生化分析仪上，与英国RANDOX CO2试剂在ALCYON生化分析仪上的应用进行对比分析。结果  中生CO2试剂低值、高值批内CV分别为2.25、2.01（n=20），批间CV分别为3.1、4.7（n=20），线性范围0～50mmol/L，与英国RANDOX CO2试剂相比，相关系数为0.9460，回归方程：Y=21.4+0.0463X。结论  评价试验表明，北京中生CO2试剂可以代替英国RANDOX CO2试剂按ALCYON生化分析仪所要求的比例使用。
   
　　【关键词】  试剂，诊断；血气分析
   
　　机体在代谢过程中可产生大量酸性物质或摄入外源性的碱性物质和酸性物质，通常情况下不会引起过酸或过碱而使生理环境改变，这是因为机体有一系列的调节系统，主要通过缓冲系统或称缓冲对（即由一种弱酸及其弱酸盐成对组成）、呼吸系统及肾脏的调节功能来调节，以维持体内的酸碱平衡状态。机体缓冲系统对酸碱平衡的调节很快，它可和体内产生的或外源性的酸碱发生反应，产生弱酸和弱酸盐，使体液中的酸碱度不会有太大的变化。在机体缓冲对中最重要的是碳酸盐缓冲对，可看作缓冲对中的“主力”。因为它的含量多，离合快，易于调节，HCO3-与H・HCO3的比例对血液酸碱度起重要作用，HCO3-与H・HCO3在血浆中的浓度比是20∶1,任何原因引起HCO3-或H・HCO3浓度改变使该比例变化都将伴随pH值的变化［1］。二氧化碳结合力（CO2CP）是指血浆HCO3-中所含的CO2量，测定这项指标可直接了解体内酸碱平衡失常的情况，对酸碱平衡类型的诊断也有很大帮助。
　　传统的CO2CP测定方法为酸碱滴定法。目前生化分析仪所用CO2试剂一般采用的是终点测定法，其原理是：磷酸烯醇式丙酮酸+HCO3-PEPC草酰乙酸+H2PO4-，草酰乙酰+NADH+H+MDH苹果酸+NAD+［2］。进口试剂一般价格较高，为降低成本，我院对北京中生公司的CO2试剂在ALCYON全自动化分析仪上的应用情况做了一些使用探讨，现报告如下。
　　1  材料与方法
　　1.1  仪器  ALCYON-300全自动生化分析仪（法国）。
　　1.2  试剂及质控物  （1）北京中生公司CO2试剂（以下缩写为CO2L），分为R1、R2两种试剂，R1为粉剂，R2为缓冲液，使用时取10ml缓冲液复溶即可。（2）（英国）RANDOX CO2试剂（以下缩写为CO2），也分为R1、R2两种试剂，用法与中生CO2试剂相同。（3）北京中生公司二氧化碳标准液，CO2浓度为25mmol/L。（4）美国Dade公司质控血清（以下缩写为QG1），批号：EX1―109，CO2浓度靶值为23.0mmol/L,范围19～27mmol/L。（5）美国Dade公司质控血清（以下缩写为QG2），批号：EX2―209，CO2浓度靶值为12.0mmol/L，范围9.7～14.3mmol/L。
　　1.3  方法  根据试剂说明书，在ALCYON-300生化分析仪上编制应用CO2试剂的试验程序如下。TYPE（反应类型）：End Pt,Unit(单位）：mmol/L，First reaqent Volume（试剂量）：380μl,Sample Volume（样品量）：2.0μl,Primary Wavelength:340nm,Reaction delay（延长时间）：5min。其余略。
2  结果
　　2.1  批内试验  取CO2L试剂用自编试验程序在ALCYON-300生化分析仪上分别对高低两种不同浓度的标本连续测定CO2 20次，同时用英国进口CO2试剂和原程序进行同样测定，结果见表1。
　　表1  CO2L和CO2试剂测定CO2浓度的批内重复性（略）
　　2.2  批间试验  按与批内试验基本相同的方法，在4天内分别对两份不同浓度的标本各测定20次，结果见表2。
　　表2  CO2L和CO2试剂测定CO2浓度的批间重复性（略）
　　2.3  线性试验  用CO2浓度分别为6.25、12.5、18.7、25.0、31.3、37.5、43.8、50.1、57.4mmol/L的系列标准液按试验程序与CO2试剂反应后，在ALCYON-300生化分析仪上测得其吸光度分别为0.1061、0.2121、0.3173、0.4242、0.5313、0.6363、0.7432、0.8501、1.0121，坐标纸上作图可见线性范围为0～50mmol/L，与说明书［1］提供的相同。
　　2.4  准确度试验  在ALCYON生化分析仪上用CO2L、CO2试剂及各自的试验程序分别对两份不同浓度的质控血清进行测定，结果见表3。
　　表3  CO2L和CO2测定不同浓度质控血清的结果  （略）
　　2.5  对比试验  用CO2L和CO2试剂分别对20例任意标本进行测定,对两者的结果进行统计,相关系数为0.9460,回归方程:Y=21.4+0.0463X。从上述中得出：批内CV分别为2.25、2.01（n=20），批间CV分别为3.1、4.7（n=20），线性范围0～50mmol/L，与英国RANDOX CO2试剂相比，相关系数为0.9460，回归方程：Y=21.4+0.0463X。评价试验［3］表明北京中生CO2试剂可以代替英国RANDOX CO2试剂按ALCYON生化分析仪所要求的比例使用。
　　3  讨论
　　CO2结合力测定方法以往都以酸碱滴定法手工操作为主，该方法酸碱试剂标定较麻烦，手工操作影响因素多，而且灵敏度低，准确度及精密度差，已逐渐被淘汰［4］。现采用终点法上机测定，操作简单、省时、省力，不仅提高了灵敏度，同时也提高了准确度和精密度，但英国RANDOX CO2试剂价格较贵，且由于供贷渠道等原因难以保证及时供应。北京中生CO2试剂分粉剂和缓冲液可保存至出厂规定的保质期，使用时只需复溶即可，但混合后保存时间不长，为避免浪费，可将当天余下试剂放入冰箱冰冻层保存，第二天放于37℃水溶箱中溶解便可照常使用，复溶时，不要来回振摇试剂，以免引起过量的CO2吸收。另外，不要将试剂长时间暴露于空气中，贮存时一定将盖拧紧，否则试剂失效可影响试验结果的准确性。
　　ALCYON-300全自动生化分析仪的试剂量只允许在180～380μl间选择，标本量只允许在2～30μl间递增，这就给北京中生CO2试剂在ALCYON-300生化分析仪上的试验程序编制带来麻烦，因为该试剂要求试剂与标本的比例为200∶1,为解决这个矛盾，本试验采取试剂与标本的比例为190∶1，完全可保证反应所需的主要成分。按该比例所做评价试验中，重复性试验表明，ALCYON-300全自动生化分析仪所测得的CO2结果符合要求，从批内到批间，其CV值逐渐增大，符合实际情况。准确性试验表明，测定值与靶值非常接近，测得结果准确可靠。线性试验表明，该试验在0～50mmol/L线性良好，超出此范围可将标本稀释后再行测定。评价试验结果的精密度、准确性都能满足临床要求，这表明北京中生CO2试剂可按试剂与样本的比例为190∶1应用于试验程序对试剂与标本有特殊加量要求的ALCYON-300全自动生化分析仪上。此外，北京中生CO2试剂还具有价格比较便宜、供应方便等优点，值得临床推广。
　　【参考文献】
　　1  周新，涂植光.临床生物化学和生物化学检验.北京：人民卫生出版社，2003，211.
　　2  叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社，1997，186-188.
　　3  郑家齐.医学检验质量控制.北京：人民卫生出版社，1998，205-269.
　　4  康格非.临床生物化学试验室数据与病例分析.重庆：重庆大学出版社，1997，99-177
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