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食管鳞状细胞癌组织telomerase及PCNA的表达意义           ★★★ 【字体：小 大】
食管鳞状细胞癌组织telomerase及PCNA的表达意义
作者：佚名    论文来源：本站原创    点击数：    更新时间：2008-10-1    
作者：李牧，曹学文，姜君威，杨永珠，张雁山
【关键词】  食管癌
    Expression of telomerase and PCNA protein in esophageal squamous cell carcinoma tissue and its significance
　　【Abstract】 AIM: To study the expression of telomerase and PCNA protein in four different pathological types of advanced esophageal cell cancer. METHODS:  One hundred and twentysix cases with esophageal cancer of different pathological types were included in study by immunohistochemistry and the results were analyzed by SPSS 10.0. RESULTS:  The positive rates of telomerase expression and PCNA were 60.0% (18/30) and 83.3%  (25/30) in fungating type, 75.0% (21/28) and 78.5% (22/28) in constrictive type, 75.0% (24/32) and 15.6% (5/32) in ulcerative type and 44.4% (16/36) and PCNA 77.8% (28/36) in medullary type. Chisquare test was performed (telomerase χ2=378.829, P<0.005 and PCNA χ2=357.656, P<0.005). CONCLUSION:  The expression of human telomerase and PCNA gene was different in advanced esophageal cell cancer of different pathological types. Simultaneous immunohistochemistry examination of both telomerase and PCNA is of significance for the prognosis of esophageal cancers.
　　【Keywords】 esophageal neoplasms; type; telomerase; PCNA; immunohistochemistry
　　【摘要】 目的：探讨telomerase与PCNA在中晚期食管癌不同大体病理类型的表达. 方法：应用免疫组织化学方法观察不同大体病理类型的中晚期食管癌共126例,其中蕈伞型30例，缩窄型28例，溃疡型32例，髓质型36例. 并用SPSS10.0软件分析结果. 结果：中晚食管鳞状细胞癌的telomerase,PCNA的阳性表达率分别是：蕈伞型60.0%与83.3%;缩窄型75.0%与78.5%;溃疡型75.0%与15.6%;髓质型44.4%与77.8%. χ2检验telomerase：χ2=378.829，P<0.005. PCNA：χ2=357.656,Ｐ<0.005，各组差异显著. 结论：telomerase，PCNA在不同的中晚期食管癌的大体分型之间表达不同，同时进行telomerase与PCNA免疫组化检测对于评估食管癌的预后会更有意义.
　　【关键词】 食管癌；类型；端粒酶；增殖细胞核抗原；免疫组化
　　0引言
　　不同恶性肿瘤telomerase,PCNA表达不同，但相同的恶性肿瘤的不同大体病理类型的telomerase，PCNA表达是否相同，尚无报道. 为了探讨食管癌大体病理类型与telomerase，PCNA表达的关系，我们作了中晚期食管癌大体分型与telomerase，PCNA表达关系的研究.
　　1材料和方法
　　1.1材料
　　200110/200310中晚期食管癌手术切除组织标本蜡块126例，均未接受放化疗，病理诊断明确，癌组织均已至少侵达肌层. 其中蕈伞型30例，溃疡型32例，缩窄型28例，髓质型36例，切片厚4 μｍ. 端粒酶兔抗人mAb和PCNA兔抗人mAb为福州迈新公司产品，SP plus免疫组化染色试剂盒和DAB显色试剂盒.
　　1.2方法
　　利用链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶连接法(ＳＰ法)免疫组化染色,按试剂盒说明书进行. 切片经常规脱蜡、水化后,用3 mL/L过氧化氢去除内源性酶,10 mmol/L柠檬酸缓冲液微波炉抗原修复. 加入一抗,磷酸缓冲液冲洗，后加ＳＰ试剂. 用已知阳性的切片作阳性对照,正常兔血清和ＰＢＳ（磷酸缓冲液）代替一抗作阴性对照. ＤＡＢ显色,苏木精复染,递升梯度乙醇脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，后经光镜观察.  食管黏膜鳞状上皮细胞核、食管癌细胞核或(和)细胞质染成棕褐色为端粒酶阳性染色,每例阳性染色的癌细胞>10%为阳性表达. PCNA定位于人食管鳞癌细胞核，细胞核染成黄褐色为阳性，阳性染色的癌细胞>10%为阳性表达.
　　统计学处理：采用SPSS 10.0软件，进行R×C表资料的χ2检验. P<0.05认为差异有统计学意义.
　　2结果
　　食管癌telomerase，PCNA表达阳性率分别为62.7%与63.5%，telomerase在缩窄型和溃疡型中的表达阳性率均为75.0%，而在髓质型中的表达阳性率为44.4%最低，PCNA在蕈伞型中的表达阳性率为83.3%最高，而在溃疡型中的表达阳性率为15.6%最低.不同的大体类型的食管鳞癌telomerase及PCNA的表达不同(P<0.01, Fig 1A,B). 食管鳞癌表达telomerase髓质型的最低，缩窄型和溃疡型最高，而PCNA蕈伞型表达最高，溃疡型的最低,差异有统计学意义(Tab 1).表1食管癌不同大体病理类型telomerase，PCNA的表达（略）
3讨论
　　食管癌大体类型与预后有关，蕈伞型预后较好，缩窄型预后较差. 近年研究表明，食管癌telomerase，PCNA表达与预后也密切相关，这两种与预后有影响的方面是否有一定的内在联系,有待研究. 端粒酶是由RNA与蛋白质组成的核糖核蛋白，其中的RNA序列是端粒DNA复制的模板，而蛋白质是一种逆转录酶，起DNA聚合酶的作用，端粒酶在DNA复制时可保持染色体的完整性，避免DNA链随复制而缩短. 端粒酶可作为恶性肿瘤的标志物［1，2］，其对区别浅表肿瘤的良恶性有较高的价值［3］. 有研究表明端粒酶可作为一些肿瘤的特殊标记物以及在基因治疗中做为新的靶点［4］. PCNA是真核细胞DNA合成所必须的一种核蛋白,近年来作为原位检测细胞增殖状态的特异性指标而用于肿瘤的动力学研究［5］. 在食管上皮癌变过程中，PCNA的过量表达起着重要作用［6］. PCNA的表达在细胞增殖周期G1后期开始升高，G1／S期交界时达高峰，S期持续高水平，G2, M期表达减少，G期无表达，它的表达是细胞处于增殖周期标志［7］.
　　我们的研究结果显示,食管鳞癌端粒酶的阳性率为62.7%，与文献报道有差别可能与我们的病例数选取较少有关,在食管癌不同大体病理类型中telomerase和PCNA的阳性表达均较强烈，telomerase,PCNA的表达与肿瘤的恶性程度有关［8］.联合检测PCNA基因可提高诊断的阳性率. 且更具有临床意义.
　　【参考文献】
　　［1］ 张雪娟，张登学,顾华丽. 食管癌及大肠癌和癌旁组织端粒酶活性的临床意义［J］.第四军医大学学报，2003；24（2）：123-125.
　　Zhang XJ, Zhang DH, Gu HL. Telomerase activity in human esophageal cancer and rectalcolon carcinoma［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2003；24（2）：123-125.
　　［2］ 范晋海，孙君昭，贺大林. 良恶性肾上腺肿瘤组织中端粒酶活性的鉴别意义［J］. 第四军医大学学报，2004；25（4）：369-370.
　　Fan JH, Sun JZ, He DL. Differential significance of telomerase activity in benign and malignant adrenal tumors［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2004；25（4）：369-370.
　　［3］ 王强，吴清明,李胜保. 细胞学联合端粒酶检测对贲门癌诊断价值的探讨［J］. 中国实用内科杂志，2001;21（7）:400.
　　Wang Q,Wu QM,Li SB. Detection and comarison of the telomerase activity in brushed cells biopsy specimen and surgical specimen of esophageal carcinoma［J］. Chin J Practical Inter Med, 2001;21(7):400.
　　［4］ 石梅，苏明权，杨秀芝，等. 宫颈癌组织中端粒酶活性测定［J］. 第四军医大学学报，2001;22(14):1321-1323.
　　Shi M, Su MQ, Yang XZ, et al. Detection of activity of telomerase in cervical carcinoma tissues［J］. J Fourth Mil Med Univ, 2001;22(14):1321-1323.
　　［5］ Kihara C, Seki T, Funkawa Y, et al. Mutations in zincbinding domain of p53 as a prognostic marker of esophageal cancer patients［J］. Jpn J Cancer Res, 2000;91(2):190-198.
　　［6］ Diez M, Ramos P, Medrano MJ, et al. Preoperatively irradiated rectal carcinoma: Analysis of the histopathologic response and predictive value of proliferating cell nuclear antigen，immunostianing［J］. Oncology,2003;64(3):213-219.
　　［7］ Maga G, Hubscher U. Proliferating cell nuclear antigen(PCNA), A dancer with many partners［J］. J Cell Sci, 2003;116(pt 15):3051-3060.
　　［8］ Niiyama H, Mizumoto K, Sato N,et al. Quantitative analysis of hTERT mRNA expression in colorectal cancer ［J］. Am J Gastroenterol, 2001;96(6):1895-1900
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