今天是：  |
| 网站首页 | 名校推荐 | 小学试卷 | 初中试卷 | 高中试卷 | 免费课件 | 免费教案 | 如何获点 | | |||
| | 教育教学 | 免费论文 | 网站留言 | | ||||
|
||||
 |
您现在的位置： 名校试卷网 >> 医学论文 >> 基础医学 >> 正文 |  用户登录  新用户注册 |
|
||||||||||
|
||||||||||
|
||||||||||
|
|||||
| 前列腺癌组织EZH2基因的表达及其意义 | |||||
作者：佚名 论文来源：本站原创 点击数： 更新时间：2008-10-4  |
|||||
|
【关键词】 前列腺肿瘤；基因；EZH2 Expression profile and significance of EZH2 gene in primary prostate cance 【Abstract】 AIM: To determine the expression of EZH2 gene in prostate cancer （PCa） and to investigate the relation between EZH2 expression and biological characters of PCa. METHODS: In 40 cases of PCa, 20 cases of benign prostate hyperplasia (BPH), 20 cases of prostatic intraepithelial neoplasia (PIN), the expression of EZH2 was detected by semiquantitative RTPCR and the amplified product was sequenced. RESULTS: All 40 PCa cases were positive in EZH2 expression. There was no expression of EZH2 gene in BPH. Only one of the 20 PIN cases was seen EZH2 expressed positively. EZH2 expression was increased in the advanced compared with the primary PCa (P＜0.05), in the lowdifferentiated compared with the highlydifferentiated PCa (P＜0.05) and in the hormonedependent compared with the hormoneindependent PCa (P＜0.05). However, EZH2 expression did not have a linear correlation with the serum total prostate specific antigen level (P＞0.05). CONCLUSION: EZH2 gene plays an important role in the development of prostaic carcinoma. Therefore, the analysis of EZH2 expression will benefit the diagnosis and treatment of prostatic carcinoma. 【Keywords】 prostatic carcinoma; gene; EZH2 【摘要】 目的：探讨EZH2基因在列腺癌组织中的表达意义. 方法：采用半定量RT－PCR检测前列腺癌、前列腺上皮内瘤(PIN)，良性前列腺增生中EZH2表达状况并对其扩增产物进行测序. 结果：前列腺癌40例组织中，EZH2表达率（100％）. 良性前列腺增生组织无表达， PIN 20例中仅有1例有表达. 晚期前列腺癌组织表达明显高于早期前列腺癌（P＜0.05）；低分化前列腺癌表达高于中高分化前列腺癌（P＜0.05）；激素依赖性前列腺癌表达高于激素非依赖性前列腺癌（P＜0.05）. EZH2表达高低与前列腺血清总PSA浓度无关（P＞0.05）. 结论：EZH2基因表达状况与前列腺癌分期、分级有关，其表达对判断前列腺癌病理生物学特性和前列腺癌治疗有重要意义. 【关键词】 前列腺肿瘤；基因；EZH2 0引言 EZH2 (enhancer of zeste homolog 2)基因是最近识别的一种人类新基因，是PcG (polycomb group)基因家族的重要成员之一. 与前列腺癌的发生发展关系密切. 我们采用RTPCR方法研究EZH2在前列腺癌、前列腺上皮内瘤、良性前列腺增生中的表达状况，探讨其在前列腺癌发生发展中的作用及意义. 1对象和方法 1.1对象良性前列腺增生标本20例，年龄（66.5±10.2）岁；前列腺上皮内瘤标本20例，年龄(64.2±11.3）岁. 前列腺癌标本40例，年龄(67.5±12.2）岁. 按国际抗癌协会(UICC)的TNM分期标准, T1期9例、T2期8例、T3期11例、T4期12例，高分化，Gleason评分2~4分12例，中分化，Gleason 5~7分18例，低分化，Gleason 8~10分10例；其中内分泌治疗后复发（雄激素非依赖性）8例. 所有标本均经病理切片证实，新鲜标本离体后立即切成小块，置于-70℃冰箱中. 1.2方法EZH2和内参照（βactin）PCR引物设计参照文献［1］，并登陆GeneBank对照无误，由北京赛百胜有限公司合成. EZH2基因上游引物序列为5′GCCAGACTGGGAAGAAATCTG3′, 下游引物序列为5′TGTGCTGGAAAATCCAAGTCA3′. 扩增产物为620 bp；βactin上游引物序列为5′CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT3′，下游引物序列为5′AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC3′，扩增产物为316 bp. 取100mg待测组织，采用Trizol一步法提取组织总RNA. 紫外分光光度计测定A260 nm和A280 nm比值在1.8~2.0之间. 1 g/L琼脂糖凝胶电泳可见28S,18S和5SRNA条带，表明RNA质量符合要求，可用于逆转录. 取2 μg总RNA进行逆转录，所得产物用于PCR. 取2 μL合成的cDAN进行PCR扩增. PCR体积50 μL,反应条件为80℃预变性1 min,94℃变性1 min，62℃退火，72℃延伸，35次循环，末次循环再延伸10 min. 取10 μL PCR产物，1 g/L琼脂糖凝胶电泳100 V，30 min. 凝胶图像定量分析系统对电泳图象进行吸光度扫描，计算待测基因的相对表达量. PCR产物测序由北京赛百胜有限公司代测. 统计学方法：采用SPSS 10.0统计软件，计量资料用x±s表示，多组数据的比较用方差分析，两组间比较用t检验，再两两用SNKq检验. P＜0.05为差异有统计学意义. 2结果 凝胶图像定量分析系统对电泳图像进行吸光度扫描，计算各组基因的相对表达量（表1）. 所表达cDNA产物经双脱氧终止法进行测序证实为EZH2基因序列（图1）. 各分期前列腺癌中表达存在差异（P＜0.05），早期癌表达明显低于中晚期癌；低分化癌中EZH2表达高于高分化癌（P＜0.05）；激素依赖型前列腺癌中的表达高于非激素依赖型（P＜0.05）. 在良性前列腺增生标本中基因无表达，在前列腺上皮内瘤中偶有表达（5％）. 血清PSA的高低与基因表达的高低无关联（P＞0.05）. 表1基因相对表达量（略） aP＜0.05 vs T1, bP＜0.05 vs T2, cP＜0.05 vs高分化, dP＜0.05 vs雄激素依赖性（+）. 3讨论 EZH2基因是果蝇Zeste基因增强子（EZH2）的人类同源物，Hobert等［2］在采用酵母双杂交实验研究与原癌基因Vav蛋白产物相互作用的过程中发现了该基因. Cardoso等［3］证实EZH2基因定位在人染色体7q35的位置上. 目前作用机制尚不明确，EZH2具有HDAC，组蛋白甲基转移酶和多种基因外的调控作用, 参与转录抑制［4］. 在前列腺癌恶性演进过程中, EZH2表达上调抑制某些肿瘤转移抑制基因, 促进前列腺癌或乳腺癌的浸润、转移［5］. A：分期越高表达量越高；B：分化程度（分化低表达量高）；C1：雄激素非依赖性（+），C2：雄激素依赖性（-）；D1：前列腺癌：D2：良性增生；D3：上皮内瘤. 图1前列腺癌组织EZH2基因扩增产物电泳图（略） 目前研究发现EZH2基因在多种肿瘤中有表达. Raaphorst等［6］发现, 在RS细胞的核内有Bmil 和EZH2共同表达现象，证实EZH2可能参与人类淋巴瘤的发生. Raaphorst等［7］报道正常静息的乳腺细胞不表达EZH2, 侵袭性乳腺癌相对于正常乳腺上皮EZH2蛋白表达是上调的. 最近的报道在膀胱肿瘤中EZH2也是随着肿瘤恶性程度增高而表达量增加［1］. Varambaly等［5］报道了EZH2在人类前列腺癌演化过程中具有重要作用. 前列腺癌恶性演进过程伴有EZH2 mR2NA和EZH2蛋白逐渐增加,在转移性前列腺癌中也明显增加. 在欧美国家前列腺癌是男性最常见的恶性肿瘤. 近年来，随着人口老龄化及生活条件的改变，在我国前列腺癌的发病率的发病率呈逐年上升的趋势. 通过对EZH2基因地研究，我们对早期发现、诊断以及治疗前列腺癌有很大的临床意义. 【参考文献】 ［1］ Arisan S, Buyuktuncer ED, PalavanUnsal N, et al. Increased expression of EZH2, a polycomb group protein in bladder carcinoma［J］.Urologia, 2005,75:252-257. ［2］ Hobert O, Jallal B, Ullrich A. Interaction of Vav wit h ENX1, a putativet ranscriptional regulator of homeobox gene expression ［J］. Mol Cell Biol, 1996, 16(6):3066-3073. ［3］ Cardoso C, Mignon C, Hetet G, et al. The human EZH2 gene: genomic organisatin and revised mapping in 7q35 within the critical region for malignant myeloid disorders ［J］. Eur J Hum Genetics, 2000, 8:174. ［4］ Kuzmichev A, Jenuwein T, Tempst P, et al. Different EZH2containing complexes target methylation of histone H1 or nucleosomal histone H3［J］. Mol Cell, 2004, 14(2): 183-193. ［5］ Varambally S, Dhanasekaran SM, Ming H, et al. The poly2comb group protein EZH2 is involved in progression of prostate cancer ［J］. Nature, 2002, 419:624-627. ［6］ Raaphorst FM, van Kemenade FJ, Blokijl T, et al. Expression of BMI1 and EZH2 polycomb group genes in reedsternberg cells of Hodgkins disease ［J］. Am J Pathol, 2000, 157:709-712. ［7］ Raaphorst FM, Meijer CJ, Fieret E, et al. poorly differentiated breast carcinoma is associated with increased expression of the human polycomb group EZH2 gene ［J］. Neoplasia, 2003, 5(6): 481-488 |
|||||
| 论文录入：guoxingxing 责任编辑：guoxingxing | |||||
| 【发表评论】【加入收藏】【告诉好友】【打印此文】【关闭窗口】 | |||||
 网友评论：（只显示最新10条。评论内容只代表网友观点，与本站立场无关！） |
| | 设为首页 | 加入收藏 | 网站简介 | 下载帮助 | 充值点数 | 版权申明 | 管理登录 | | |||
|
建议浏览分辨率：1024*768